بیان و خالص سازی آنزیم رنیلالوسیفراز و مطالعه اثر پلی اولها بر فعالیت سینتیکی آن
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم پایه
- نویسنده گلنوش خوشنویسان
- استاد راهنما رحمان امام زاده ریحانه سریری محبوبه نظری
- سال انتشار 1393
چکیده
رنیلالوسیفراز آنزیم بیولومینسانس کننده ای است که به عنوان مارکر سلولی در پژوهش های زیستی مورد استفاده قرار می-گیرد. با توجه به اهمیت کاربردی این آنزیم، بررسی ویژگی های ساختاری، عملکردی و سینتیکی آنزیم و هم چنین رابطه ساختار و عملکرد آن در محیط های مختلف و مطالعه ی تاثیر ترکیبات مختلف بر پایداری سینتیکی و حرارتی این آنزیم به شناخت هر چه بیشتر آن کمک خواهد کرد. در این پژوهش فعالیت و کارایی کاتالیتیک آنزیم رنیلا لوسیفراز در غلظت های مشخصی از دو ترکیب اسمولیت گلیسرول و سوربیتول اندازه گیری و بررسی شد، تغییرات ساختار دوم و سوم آن در حضور این دو ترکیب مورد بررسی قرار گرفت و به کمک شبیه سازی مولکولی آنزیم در حضور این ترکیبات رابطه ساختار و عملکرد آنزیم مطالعه شد. همچنین تاثیر گلیسرول و سوربیتول بر پایداری حرارتی آنزیم مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که کارایی کاتالیتیک آنزیم رنیلا لوسیفراز در نتیجه ی ورود مولکول های گلیسرول به کانال اصلی آنزیم کاهش می یابد و نوع پراکنش مولکول های سوربیتول در اطراف دهانه کانال اصلی آنزیم کارایی کاتالیتیک این آنزیم را تحت تاثیر قرار می دهد. آزادی تحرک آمینواسیدهای موجود در پیچ های سطحی آنزیم با افزایش غلظت گلیسرول و سوربیتول کاهش یافته و بنابراین ساختار سوم آنزیم رنیلا لوسیفراز تغییر یافته و دسترسی کروموفور ans به مناطق هیدروفوب پروتئین افزایش می یابد. آنزیم رنیلا لوسیفراز در حضور گلیسرول و سوربیتول به اندازه ی مورد انتظار پایدار نشد.
منابع مشابه
مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure
کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...
متن کاملبهینه سازی شرایط بیان آنزیم کیتیناز42 کایمری در میزبان پروکاریوتی و مقایسه فعالیت آن با آنزیم کیتیناز42
آنزیم¬های کایمری از جمله پروتئین¬های مهندسی شده می¬باشند که از تغییر در ساختار آنزیم¬ها بدست می¬آیند. آنزیم¬های کیتینازی بدلیل توانایی در تجزیه ترکیبات کیتینی، در تولید پروتوپلاست قارچی، تبدیل زیستی shellfish waste به بخش‌های تک جزئی، تولید الیگوساکاریدها و کنترل قارچ¬های بیماریزا حائز اهمیت می-باشند. در این تحقیق پس از تکثیر ناحیه (chitin binding domain) ChBD کیتینازB باکتری Serratia marcesce...
متن کاملکلونینگ، بیان، خالص سازی و ارزیابی آنزیم لیزواستافین نوترکیب با استفاده از سیستم کلونینگ pBAD
Background and purpose: Staphylococcus aureus is an important nosocomial pathogen which causes some diseases such as endocarditis, osteomyelitis, pneumonia, toxic shock syndrome, and food poisoning. The excessive and inappropriate use of antibiotics in the treatment of these diseases causes resistance to many antibiotics. Lysostaphin is an effective agent in the treatment of staphylococcal infe...
متن کاملکلونینگ ، بیان ژن، خالص سازی و تعیین خصوصیات آنزیم الاستاز حاصل از باکتری سودوموناس آئروجینوزا
سابقه و هدف: الاستاز حاصل از سودوموناس آئروجینوزا یک آنزیم مهم در زمینه مطالعات بنیادی بر روی Zn-متالوپروتئازها و نیز بعنوان فاکتور ویرولانس این باکتری مطرح است. در این مطالعه ژن مربوط به آنزیم الاستاز از سودوموناس آئروجینوزا (PAE) استخراج و کلون شده و پس از بیان و تخلیص، خصوصیات بیوشیمیایی آن شامل دما و pH بهینه و نیز فعالیت در حور حلالهای آلی گلیسرول، دی متیل فرمامید (DMF)، متانول، اتانول، ا...
متن کاملخالص سازی و بررسی خواص سینتیکی آنزیم هیستامیناز از گونه خلر ( Lathyrus sativus ) با استفاده از کروماتوگرافی تعویض آنیون
Background : The histamine poisoning directly correlates to improper preservation of foods. Diamine oxidase catalyses the oxidative deamination of histamine and other biogenic amines such as cadaverine and putrescine. Plant diamine oxidases are of widespread occurrence in Leguminaceae such as Cicer arietinum, Lathyrus sativus and Vigna radiata. For this reason, this study was carried out to exa...
متن کاملخالص سازی آنزیم پلی گالاکتوروناز جدایه (IKO6) قارچAscochyta rabiei : عامل بیماریبرق زدگی در نخود
Ascochyta blight caused by Ascochyta rabiei is one of the major diseases of chickpea (Cicer arientinum) in Iran. Many phytopathogenic microorganisms, incuding A .rabiei, attack their host plant by secreting pectic enzymes including polygalacturonase (PG) which causes modification of cell-wall structure, increasing accessibility of cell-wall components for degradation by other enzymes. Polygalac...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم پایه
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023